Plasmide Double Nickase (h) atrophin-2: sc-404346-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) atrophin-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide atrophin-2 Double Nickase (h) et le plasmide atrophin-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RERE. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: atrophin-2 Antibody (REREF1H8): sc-81115
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) atrophin-2 | sc-404346-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) atrophin-2 | sc-404346-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RERE code pour l’atrophine-2, un corégulateur nucléaire de la transcription qui s’associe à des complexes de modification de la chromatine afin de coordonner des programmes d’expression génique au cours du développement et de la spécification du destin cellulaire. L’atrophine-2 contribue à la répression et à l’activation transcriptionnelles via des interactions avec des récepteurs nucléaires et des régulateurs épigénétiques, ce qui la relie à la différenciation, aux processus neurodéveloppementaux et à des sorties de signalisation dépendantes de la lignée. Une altération de la fonction de RERE est associée à des syndromes du développement et à des anomalies congénitales, et une dérégulation du contrôle transcriptionnel impliquant l’atrophine-2 a été étudiée dans le contexte de phénotypes neurologiques. En tant que régulateur d’une transcription dépendante de l’état de la chromatine, RERE est pertinent pour explorer comment le contrôle épigénétique façonne l’identité cellulaire et les réseaux de gènes répondant au stress.
atrophin-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RERE dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RERE. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RERE. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RERE.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.