Plasmide Double Nickase (h) ATP5G1: sc-416816-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATP5G1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATP5G1 Double Nickase (h) et le plasmide ATP5G1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATP5G1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ATP5G1 Antibody (1A12): sc-293324
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATP5G1 | sc-416816-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATP5G1 | sc-416816-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP5G1 code une sous-unité de l’ATP synthase (complexe V) localisée dans la mitochondrie, au sein du secteur F0, qui contribue à la translocation des protons et à une production efficace d’ATP via la phosphorylation oxydative. En favorisant le couplage de la chaîne de transport des électrons à la synthèse d’ATP, ATP5G1 influence le potentiel de membrane mitochondriale, l’homéostasie énergétique cellulaire et des processus en aval tels que la gestion des espèces réactives de l’oxygène et la susceptibilité à l’apoptose. Une perturbation de la fonction de l’ATP synthase et, plus largement, des voies OXPHOS est impliquée dans des phénotypes de dysfonctionnement mitochondrial pertinents pour la neurodégénérescence, le stress cardiométabolique et le remodelage bioénergétique des cellules cancéreuses. En tant que composant central de la conversion énergétique mitochondriale, ATP5G1 est fréquemment étudié dans des contextes de reprogrammation métabolique, d’adaptation à l’hypoxie et de contrôle qualité mitochondrial.
ATP5G1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATP5G1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATP5G1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATP5G1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATP5G1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.