Plasmide Double Nickase (h) ATP11B: sc-411692-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATP11B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATP11B Double Nickase (h) et le plasmide ATP11B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATP11B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATP11B | sc-411692-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATP11B | sc-411692-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP11B code une flippase de phospholipides de type P4‑ATPase qui contribue au maintien de l’asymétrie lipidique membranaire en transloquant des aminophospholipides à travers les bicouches, soutenant ainsi la formation de vésicules, le trafic membranaire et l’homéostasie des organites. Par son rôle dans les processus de transport associés aux endosomes et à l’appareil de Golgi, ATP11B participe aux voies de tri et de recyclage qui influencent la localisation des récepteurs et la signalisation intracellulaire. Une perturbation de la dynamique de translocation des lipides peut modifier la polarité cellulaire, les réponses au stress et les transports dépendants des membranes, ce qui fait d’ATP11B une cible pertinente pour l’étude de la protéostase et des phénotypes liés au trafic. Des altérations de l’expression ou de la fonction d’ATP11B ont été associées dans la littérature à des modifications du transport/de la prise en charge des médicaments et de la tolérance cellulaire au stress, ce qui motive des investigations mécanistiques en biologie du cancer et dans des modèles de chimiorésistance.
ATP11B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATP11B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATP11B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATP11B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATP11B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.