Plasmide Double Nickase (h) ATF3: sc-416577-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATF3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATF3 Double Nickase (h) et le plasmide ATF3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATF3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATF3 | sc-416577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATF3 | sc-416577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF3 (activating transcription factor 3) est un facteur de transcription bZIP de réponse immédiate, inductible par le stress, qui intègre divers signaux cellulaires, notamment les voies MAPK/JNK, NF-κB et la réponse aux protéines mal conformées (unfolded protein response, UPR). En se liant à des éléments de type CRE/ATF et en formant des homo- ou hétérodimères avec des membres de la famille AP‑1, ATF3 module des programmes transcriptionnels qui contrôlent l’inflammation, l’apoptose, l’adaptation du cycle cellulaire et le remaniement métabolique. Son expression est rapidement induite par les dommages à l’ADN, le stress oxydatif, les cytokines et le stress du réticulum endoplasmique, ce qui fait d’ATF3 un régulateur clé des réponses transcriptionnelles adaptatives. Une activité dérégulée d’ATF3 a été associée à la biologie tumorale, à la signalisation immunitaire et à des modèles de lésions tissulaires, ce qui en fait un outil utile pour disséquer, dans des cellules humaines, des réseaux de stress et d’inflammation dépendants du contexte.
ATF3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATF3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATF3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATF3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATF3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.