Plasmide Double Nickase (m) Asporin: sc-426152-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Asporin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Asporin Double Nickase (m) et le plasmide Asporin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Aspn. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Asporin | sc-426152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Asporin | sc-426152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Aspn code pour l’asporine, un petit protéoglycane riche en leucines de la matrice extracellulaire qui contribue à la fibrillogenèse du collagène et à la régulation de l’organisation de la matrice dans les tissus musculosquelettiques. L’asporine murine peut moduler la signalisation des facteurs de croissance, notamment via des interactions influençant les voies de la famille TGF-β, affectant ainsi la chondrogenèse, l’ostéogenèse et l’homéostasie des tissus fibrocartilagineux. Une expression ou une fonction altérée d’ASPN a été associée à une dérégulation du remodelage de la matrice extracellulaire et de la signalisation inflammatoire, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’arthrose, de la dégénérescence des disques intervertébraux, des pathologies des tendons/ligaments et des modifications de la matrice liées à la fibrose. Les modèles in vitro et in vivo utilisent souvent des perturbations d’Aspn pour analyser comment les signaux issus de la matrice stromale orientent l’adhésion cellulaire, la mécanotransduction et les programmes de différenciation.
Asporin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Aspn dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Aspn. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Aspn. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Aspn.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.