ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400429-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ASGR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1: sc-393849
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400429-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400429-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ASGR1 kodiert die Hauptuntereinheit des hepatischen Asialoglykoprotein-Rezeptors (ASGPR1), eines C‑Typ-Lektins, das überwiegend auf der Oberfläche von Hepatozyten exprimiert wird und desialylierte Glykoproteine mit terminaler Galaktose oder N‑Acetylgalaktosamin erkennt. Nach Ligandenbindung vermittelt ASGPR1 die clathrinabhängige Endozytose und den Transport in endo‑lysosomale Kompartimente und unterstützt damit die Clearance von Glykoproteinen sowie die homöostatische Regulation zirkulierender Proteine. Dieser Rezeptor ist an der Kohlenhydraterkennung und an vesikulären Transportprozessen beteiligt, die mit leberspezifischen Stoffwechselwegen und der Rezeptor‑Recycling-Dynamik verknüpft sind. Veränderte ASGR1‑Funktion oder ‑Expression wird häufig im Zusammenhang mit Leberfunktionsstörungen und dem Lipidstoffwechsel untersucht, was ASGR1 zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien in der Leberbiologie macht.
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ASGR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ASGR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ASGR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ASGR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.