Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ASC-1 (m): sc-425141
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Asc-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Asc-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ASC-1 Antibody (F-8): sc-365202
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ASC-1 (m) | sc-425141 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Trip4 code ASC-1, un coactivateur transcriptionnel qui agit au sein du complexe Activating Signal Cointegrator-1 (ASC-1) pour relier des facteurs de transcription spécifiques de séquence à la machinerie de l’ARN polymérase II. ASC-1 contribue à la régulation de programmes d’expression génique liés à la signalisation des récepteurs nucléaires et, plus largement, au contrôle transcriptionnel, notamment dans des processus qui influencent la différenciation, le métabolisme et les réponses cellulaires au stress. Dans les systèmes murins, la modulation transcriptionnelle dépendante de Trip4 est utilisée pour analyser comment les coactivateurs intègrent des signaux afin de façonner les sorties transcriptionnelles associées à la chromatine. Une altération de la fonction du complexe ASC-1 a été associée à une dérégulation de programmes géniques du développement et neuromusculaires, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de réseaux transcriptionnels liés à des maladies, sans présumer de conséquences cliniques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Asc-1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Trip4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Trip4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Trip4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Asc-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Trip4 pour l'étude de la signalisation de Asc-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Trip4 essentiels à la fonction de Asc-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Trip4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Asc-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Asc-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Trip4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Asc-1 plasmide HDR (m) et le Asc-1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Trip4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Trip4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.