Plasmide Double Nickase (h) ARRDC4: sc-406413-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ARRDC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARRDC4 Double Nickase (h) et le plasmide ARRDC4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARRDC4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ARRDC4 | sc-406413-NIC | 20 µg | $410.00 |
ARRDC4 (arrestin domain containing 4) code une protéine adaptatrice cytosolique de la famille des α‑arrestines, qui se lie aux protéines membranaires et s’interface avec les voies de trafic dépendantes de l’ubiquitine. ARRDC4 est impliquée dans l’endocytose et le tri des cargos en recrutant des ligases E3 de la famille NEDD4, influençant ainsi le renouvellement des récepteurs et la durée de la signalisation. La régulation transcriptionnelle d’ARRDC4 est associée aux réponses au stress métabolique, notamment aux programmes liés à l’hypoxie et à la disponibilité en nutriments, et a été mise en relation avec la modulation du transport du glucose et de l’homéostasie énergétique cellulaire. Des altérations de l’expression d’ARRDC4 ont été rapportées dans des contextes pertinents pour les maladies métaboliques et la biologie du cancer, ce qui en fait un nœud utile pour étudier l’adaptation de la signalisation et le contrôle qualité des protéines membranaires.
ARRDC4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARRDC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARRDC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARRDC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARRDC4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.