Partículas Lentivirales de Activación (h) ARP-1: sc-405241-LAC

NR2F2 codifica ARP-1 (también conocido como COUP-TFII), un receptor nuclear huérfano que actúa como factor de transcripción específico de secuencia y regula decisiones de destino celular y programas génicos específicos de tejido. ARP-1 se integra con la señalización de receptores nucleares para modular la actividad de potenciadores (enhancers) y promotores, influyendo en procesos como la angiogénesis, el desarrollo de órganos, la regulación metabólica y las transiciones epitelio-mesenquimatosas. Mediante un control transcripcional dependiente del contexto, NR2F2 participa en vías que modelan la biología vascular y el patrón del desarrollo, y se ha vinculado en la literatura con anomalías congénitas y estados de diferenciación desregulados relevantes para la biología del cáncer. Estas características hacen de NR2F2 un nodo útil para estudiar redes transcripcionales, la expresión génica regulada por la cromatina y la especificación de linaje en células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ARP-1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de NR2F2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ARP-1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción NR2F2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ARP-1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo NR2F2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.