Plasmide Double Nickase (h) ARID3A: sc-404552-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ARID3A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARID3A Double Nickase (h) et le plasmide ARID3A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARID3A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARID3A Antibody (A-4): sc-398367
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ARID3A | sc-404552-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ARID3A | sc-404552-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARID3A (AT-rich interaction domain 3A) code un facteur de transcription se liant à l’ADN, appartenant à la famille ARID, qui reconnaît des éléments régulateurs riches en AT et contribue à façonner le contrôle de l’expression génique dépendant de la chromatine. Il participe à des programmes transcriptionnels associés aux lignages, avec des rôles marqués dans la différenciation hématopoïétique et des cellules B, la régulation des gènes des immunoglobulines, ainsi que la modulation des voies du cycle cellulaire et de l’apoptose. Par ses interactions avec des cofacteurs et la machinerie de remodelage de la chromatine, ARID3A influence des réseaux transcriptionnels liés à la prolifération, à la signalisation immunitaire et à l’identité cellulaire. Une expression ou une fonction dérégulée d’ARID3A a été associée à des altérations du développement des cellules immunitaires et à des états transcriptionnels oncogéniques dans des contextes de tumeurs hématologiques et solides, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel.
ARID3A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARID3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARID3A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARID3A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARID3A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.