ARID1B Lentiviral Activation Particles (h): sc-402365-LAC

ARID1B kodiert eine Kernuntereinheit des ATP‑abhängigen SWI/SNF‑(BAF-)Chromatin‑Remodeling‑Komplexes, der die Positionierung von Nukleosomen und die Zugänglichkeit des Chromatins reguliert, um Transkriptionsprogramme zu steuern. Durch die Umgestaltung der Architektur von Enhancern und Promotoren beeinflusst ARID1B die Festlegung von Zelllinien, den Fortschritt des Zellzyklus und Netzwerke der DNA‑Schadensantwort und integriert dabei Signale über Entwicklungs‑ und Differenzierungspfade hinweg. Eine veränderte ARID1B‑Aktivität stört die epigenetische Regulation und die Bindung von Transkriptionsfaktoren und wirkt sich damit auf die zelluläre Identität sowie die Aufrechterhaltung des Chromatinzustands aus. Eine genetische Störung oder Fehlregulation von ARID1B wurde mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen und krebsassoziierten Defekten des Chromatin‑Remodelings in Verbindung gebracht, weshalb es ein breit untersuchter Knotenpunkt in der transkriptions‑ und epigenomorientierten Forschung ist.

ARID1B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ARID1B-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ARID1B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ARID1B-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ARID1B-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ARID1B-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.