Date published: 2026-7-12

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Plasmide Double Nickase (h) ARID1B: sc-402365-NIC

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Fiches techniques
  • Espèces cibles: human
  • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
  • Le Plasmide Double Nickase (h) ARID1B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
  • Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
  • L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
  • Le plasmide ARID1B Double Nickase (h) et le plasmide ARID1B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARID1B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
  • Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARID1B Antibody (KMN1): sc-32762
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    Plasmide Double Nickase (h) ARID1B

    sc-402365-NIC
    20 µg
    $410.00

    ARID1B code une sous-unité de liaison à l’ADN du complexe de remodelage de la chromatine SWI/SNF (BAF) dépendant de l’ATP, qui régule le positionnement des nucléosomes ainsi que l’accessibilité entre enhancers et promoteurs afin de façonner les programmes transcriptionnels. Par ses rôles dans l’organisation de la chromatine, ARID1B influence la spécification des lignages, le contrôle du cycle cellulaire et l’expression de gènes associés à la différenciation, en interaction avec des voies qui gouvernent la transcription au cours du développement et en réponse au stress. La perturbation de la fonction d’ARID1B modifie la régulation épigénétique et la fidélité transcriptionnelle, ce qui en fait un facteur clé dans les études de la régulation du génome. La dérégulation des composants de SWI/SNF, dont ARID1B, est fréquemment étudiée dans le cadre de troubles du développement et d’anomalies de remodelage de la chromatine associées au cancer.

    ARID1B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARID1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARID1B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARID1B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

    Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARID1B.

    Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.