ARID1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433726

Visão geral

Arid1b codifica a ARID1B, uma subunidade do complexo de remodelamento de cromatina SWI/SNF (BAF) dependente de ATP, contendo um domínio de interação com regiões ricas em AT, que regula o posicionamento de nucleossomos e a acessibilidade de enhancers. Por meio do controle do estado da cromatina, a ARID1B influencia programas transcricionais que governam a especificação do destino celular, a proliferação e a diferenciação, com papéis de destaque no desenvolvimento neural e na expressão gênica restrita a linhagens. A ARID1B participa da regulação epigenética que se integra a vias como Wnt/β-catenina, Notch e o controle do ciclo celular, moldando resultados transcricionais dependentes do contexto. A disrupção da função de ARID1B tem sido associada a distúrbios do desenvolvimento e a fenótipos do neurodesenvolvimento, e a composição alterada do SWI/SNF é frequentemente estudada em modelos relevantes de doença relacionados à desregulação transcricional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ARID1B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Arid1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Arid1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Arid1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ARID1B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Arid1b para a investigação da sinalização de ARID1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Arid1b críticos para a função ARID1B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Arid1b para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ARID1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ARID1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Arid1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ARID1B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ARID1B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Arid1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Arid1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.