Plasmide Double Nickase (h) ARH1: sc-410678-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ARH1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARH1 Double Nickase (h) et le plasmide ARH1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADPRH. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ARH1 | sc-410678-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ARH1 | sc-410678-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADPRH humain code l’hydrolase 1 de l’ADP‑ribosylarginine (ARH1), une enzyme cytosolique qui enlève l’ADP‑ribose des résidus d’arginine afin d’inverser la mono‑ADP‑ribosylation. En restaurant les chaînes latérales protéiques natives après l’activité des ADP‑ribosyltransférases, ARH1 contribue à la régulation de la dynamique des modifications post‑traductionnelles qui influencent la signalisation, le remodelage du cytosquelette et les réponses au stress. Cette activité de dés‑ADP‑ribosylation s’inscrit dans une biologie plus large de l’ADP‑ribose, pertinente pour les interactions hôte–pathogène et l’homéostasie cellulaire. Une dérégulation du renouvellement de l’ADP‑ribosylation a été associée à des altérations de la signalisation inflammatoire et des voies de maintien du génome, faisant d’ADPRH un locus utile pour des études mécanistiques du contrôle des voies.
ARH1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADPRH dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADPRH. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADPRH. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADPRH.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.