Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Arc (m): sc-419184
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Arc Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Arc, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Arc Antibody (C-7): sc-17839
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Arc (m) | sc-419184 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Arc (protéine associée au cytosquelette et régulée par l’activité) est un gène à réponse immédiate induit par l’activité neuronale et essentiel à la plasticité synaptique qui sous-tend l’apprentissage et la mémoire chez la souris. Arc régule le trafic endocytique des récepteurs du glutamate de type AMPA et coordonne le remodelage du cytosquelette d’actine, modulant ainsi la force synaptique lors de la potentialisation à long terme et de la dépression à long terme. Elle participe également à des programmes d’expression génique dépendants de l’activité et à l’homéostasie synaptique (synaptic scaling) qui stabilise l’excitabilité des réseaux neuronaux. Une dérégulation de la signalisation d’Arc a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, et Arc est fréquemment étudiée dans le contexte des troubles cognitifs et des altérations des réseaux liées aux crises d’épilepsie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Arc (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Arc dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Arc, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Arc à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Arc.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Arc pour l'étude de la signalisation de Arc, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Arc essentiels à la fonction de Arc
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Arc pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Arc plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Arc plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Arc. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Arc plasmide HDR (m) et le Arc (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Arc pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Arc définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.