apoO Double Nickase Plasmid (h): sc-413137-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apoO Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apoO Double-Nickase-Plasmid (h) und apoO Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf APOO abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apoO Double Nickase Plasmid (h) | sc-413137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoO Double Nickase Plasmid (h2) | sc-413137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **APOO** codiert Apolipoprotein O (apoO), ein mitochondrienassoziiertes Apolipoprotein, das an der Regulation der oxidativen Phosphorylierung und des zellulären Energiestoffwechsels beteiligt ist. apoO wird mit der Organisation der mitochondrialen Membran und der Redox-Homöostase in Verbindung gebracht und ist damit an Signalwegen beteiligt, die den Lipidumsatz, das Gleichgewicht reaktiver Sauerstoffspezies und stressantwortliche Signalgebung steuern. Eine veränderte APOO-Expression wurde im Zusammenhang mit metabolischen Dysfunktionen und kardiovaskulär geprägten Phänotypen beschrieben, was mit einer Rolle in der mitochondrialen Leistungsfähigkeit und lipidassoziierten Prozessen vereinbar ist. Diese Eigenschaften machen APOO zu einem nützlichen Ziel, um zu untersuchen, wie mitochondriale Lipid-Protein-Interaktionen den bioenergetischen Zustand und nachgeschaltete Transkriptionsprogramme beeinflussen.
apoO Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des APOO-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von APOO abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die APOO-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit APOO-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.