Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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apolipoprotein E/apoE Double Nickase Plasmid (m): sc-419167-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apolipoprotein E/apoE Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apolipoprotein E/apoE Double-Nickase-Plasmid (m) und apolipoprotein E/apoE Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Apoe abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: apolipoprotein E/apoE: sc-390925
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apolipoprotein E/apoE Double Nickase Plasmid (m) | sc-419167-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Apoe** kodiert Apolipoprotein E (apoE), ein sezerniertes lipbindendes Protein, das den Transport von Cholesterin und Triglyzeriden vermittelt, indem es sich an Lipoproteinpartikel anlagert und mit Mitgliedern der LDL-Rezeptorfamilie interagiert. ApoE reguliert die Aufnahme von Lipoproteinen, den Lipidstoffwechsel in Makrophagen sowie inflammatorische Signalwege und verknüpft dabei Prozesse wie die Lipoprotein-Clearance, den reversen Cholesterintransport und mikrogliale Antworten im zentralen Nervensystem. In Mausmodellen beeinflusst der Apoe-Status maßgeblich die Biologie atherosklerotischer Plaques, den hepatischen Lipidstoffwechsel und neuroimmunologische Phänotypen, die mit Amyloidablagerung und der Aufrechterhaltung von Synapsen in Verbindung stehen. Diese Funktionen machen Apoe zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung kardiometabolischer Krankheitsmechanismen sowie des in vivo und in Primärzellen relevanten Zusammenspiels von Lipid- und Immunprozessen bei Neurodegeneration.
apolipoprotein E/apoE Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Apoe-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Apoe abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Apoe-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Apoe-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.