Plasmide Double Nickase (h) apoF: sc-407655-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) apoF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide apoF Double Nickase (h) et le plasmide apoF Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APOF. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) apoF | sc-407655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) apoF | sc-407655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOF code l’apolipoprotéine F (apoF), une glycoprotéine sécrétée associée aux particules HDL et LDL, qui module le remodelage des lipoprotéines et le transport du cholestérol. L’apoF influence les processus d’échange lipidique dans le plasma, notamment des voies liées à l’activité de la lécithine–cholestérol acyltransférase (LCAT) et à la clairance médiée par les récepteurs des lipoprotéines, contribuant ainsi à l’homéostasie lipidique systémique. Des variations de l’expression et de la fonction d’APOF ont été associées à des profils lipidiques circulants modifiés et à des traits de risque cardiométabolique, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des mécanismes liés aux dyslipidémies. Dans des modèles cellulaires et animaux, APOF constitue un nœud expérimental accessible pour explorer la biologie des HDL, la gestion hépatique des lipides et les interactions gène–environnement qui affectent le métabolisme lipidique.
apoF Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APOF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APOF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APOF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APOF.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.