Plasmide Double Nickase (m) apoC-I: sc-419163-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) apoC-I correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide apoC-I Double Nickase (m) et le plasmide apoC-I Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Apoc1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) apoC-I | sc-419163-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) apoC-I | sc-419163-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’apolipoprotéine C-I (apoC-I), codée chez la souris par le gène *Apoc1*, est une petite apolipoprotéine sécrétée, enrichie dans les lipoprotéines riches en triglycérides ainsi que dans les HDL, qui module le transport et la clairance des lipides plasmatiques. Elle influence le remodelage des lipoprotéines et leur captation médiée par des récepteurs en régulant l’activité des lipases et les interactions avec les récepteurs hépatiques, reliant *Apoc1* aux voies qui gouvernent le métabolisme des triglycérides, le trafic du cholestérol et l’équilibre énergétique systémique. Dans les macrophages et d’autres compartiments myéloïdes, l’expression de *Apoc1* est associée à des programmes de gestion des lipides et à des réseaux de signalisation inflammatoire qui façonnent la biologie des cellules spumeuses. Une dérégulation des niveaux d’apoC-I ou de l’activité du locus *Apoc1* a été étudiée dans le contexte des dysfonctions métaboliques et de processus liés à l’athérosclérose, étayant des recherches mécanistiques sur l’inflammation induite par les lipides.
apoC-I Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Apoc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Apoc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Apoc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Apoc1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.