Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3B: sc-401700-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide APOBEC3B Double Nickase (h) et le plasmide APOBEC3B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APOBEC3B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3B | sc-401700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) APOBEC3B | sc-401700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOBEC3B (sous-unité catalytique 3B de l’enzyme d’édition de l’ARNm de l’apolipoprotéine B) est une cytidine désaminase agissant sur l’ADN simple brin, qui convertit la cytosine en uracile lors de la réplication et de la réparation de l’ADN, générant des signatures mutationnelles caractéristiques de type C→T/G. Elle participe à la défense antivirale intrinsèque et s’articule avec les réponses au stress réplicatif, la signalisation des dommages à l’ADN et des processus de réparation mutagènes qui influencent la stabilité du génome. Une activité dérégulée d’APOBEC3B a été associée à une augmentation de la charge de mutations somatiques et à l’évolution tumorale dans de nombreux types de cancer, ce qui en fait un facteur clé dans les études de la mutagenèse, de la diversification clonale et des voies de maintien du génome. Les chercheurs étudient fréquemment APOBEC3B dans le contexte de l’immunité innée régulée par les interférons, du métabolisme des acides nucléiques et des mécanismes reliant l’exposition d’ADN simple brin associée à la réplication à l’activité d’édition.
APOBEC3B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APOBEC3B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APOBEC3B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APOBEC3B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APOBEC3B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.