Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3A: sc-418267-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide APOBEC3A Double Nickase (h) et le plasmide APOBEC3A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APOBEC3A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) APOBEC3A | sc-418267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) APOBEC3A | sc-418267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’APOBEC3A humaine code une désaminase de cytidine agissant sur l’ADN simple brin, appartenant à la famille APOBEC, qui catalyse l’édition C→U et peut générer des mutations via la réplication et le traitement par la réparation par excision de base. APOBEC3A est induite par la signalisation de l’immunité innée, notamment les voies de l’interféron, et contribue à la défense cellulaire contre les génomes viraux et les rétroéléments endogènes. Son activité s’inscrit à l’interface de la réponse aux dommages de l’ADN et des processus de maintien du génome, et une expression dérégulée ou un mauvais ciblage est associée à des signatures mutationnelles caractéristiques observées dans de nombreux types de cancers. En conséquence, APOBEC3A est largement étudiée pour ses rôles dans la restriction antivirale, la mutagenèse associée à l’inflammation et les mécanismes d’instabilité génomique.
APOBEC3A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APOBEC3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APOBEC3A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APOBEC3A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APOBEC3A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.