APLNR Lentiviral Activation Particles (m): sc-423839-LAC

Das Mausgen **Aplnr** kodiert den Apelinrezeptor (**APLNR**), einen GPCR der Klasse A, der Apelin- sowie ELA/Toddler-Peptide bindet und so die kardiovaskuläre Entwicklung, den Gefäßtonus und die Flüssigkeitshomöostase reguliert. Die APLNR-Signalübertragung koppelt primär an **Gi** und nachgeschaltete **MAPK/ERK-**, **PI3K–AKT-** sowie calciumabhängige Signalwege und beeinflusst dadurch endotheliale Migration, angiogenes Remodelling und die Funktion von Kardiomyozyten. In der biomedizinischen Forschung wird eine veränderte Aktivität der Apelin–APLNR-Achse in Modellen für Herzinsuffizienz, pulmonale Hypertonie, ischämische Schädigung und metabolischen Stress untersucht, wobei die rezeptorgesteuerte Signalgebung Entzündung, Fibrose und Gewebeperfusion beeinflusst.

APLNR Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Aplnr-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

APLNR Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Aplnr-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen APLNR-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Aplnr-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.