Plasmide Double Nickase (m) Apelin: sc-424407-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Apelin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Apelin Double Nickase (m) et le plasmide Apelin Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Apln. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Apelin | sc-424407-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Apln** code l’apéline, un ligand peptidique sécrété du récepteur couplé aux protéines G **APJ/APLNR**, qui régule l’homéostasie cardiovasculaire, l’angiogenèse, l’équilibre hydrique et la signalisation métabolique. L’interaction apéline–APJ active des voies liées à **PI3K–AKT**, **ERK/MAPK** et **AMPK**, influençant la migration des cellules endothéliales, la production de monoxyde d’azote et le remodelage vasculaire, et elle recoupe des programmes induits par l’hypoxie tels que les réponses dépendantes de **HIF**. Dans le système nerveux central et les tissus périphériques, l’apéline contribue à la régulation neuroendocrinienne et à l’équilibre énergétique, avec des effets dépendants du contexte sur l’inflammation et les processus associés à la fibrose. Une signalisation **Apln/apéline** altérée est fréquemment étudiée dans des modèles d’insuffisance cardiaque, d’hypertension, d’ischémie, de dysfonction métabolique et d’angiogenèse associée aux tumeurs afin de comprendre les déterminants, au niveau des voies, des phénotypes pathologiques.
Apelin Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Apln dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Apln. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Apln. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Apln.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.