Plasmide Double Nickase (h) Apelin: sc-401548-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Apelin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Apelin Double Nickase (h) et le plasmide Apelin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant APLN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Apelin Antibody (2A1-2D5): sc-293441
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Apelin | sc-401548-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Apelin | sc-401548-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’APLN humain code l’apéline, un ligand peptidique sécrété du récepteur APJ/APLNR couplé aux protéines G, qui régule le tonus vasculaire, la signalisation angiogénique, la contractilité cardiaque et l’homéostasie hydrique. L’interaction apéline–APJ active des voies en aval, notamment PI3K/AKT, ERK/MAPK et eNOS/NO, modulant la migration des cellules endothéliales, la réactivité du muscle lisse et le dialogue métabolique entre tissu adipeux et muscle squelettique. Une dérégulation de la signalisation de l’apéline a été associée au remodelage cardiovasculaire, aux maladies vasculaires pulmonaires et à des dysfonctionnements métaboliques, faisant d’APLN un point d’entrée pertinent pour étudier la communication peptide–GPCR en contexte de stress et d’inflammation. En biologie tumorale, l’apéline peut influencer les programmes d’adaptation à l’hypoxie et la dynamique des niches vasculaires, soutenant des études mécanistiques de la signalisation du microenvironnement sans suggérer de bénéfice clinique.
Apelin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus APLN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de APLN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de APLN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de APLN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.