Plasmide CRISPR/Cas9 KO APEG1 (m): sc-419147
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- APEG1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique APEG1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO APEG1 (m) | sc-419147 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Speg code pour APEG1, une sérine/thréonine kinase enrichie dans le muscle strié, impliquée dans l’organisation du cytosquelette et le couplage excitation–contraction. APEG1 est associée à l’intégrité des myofibrilles et à l’homéostasie des triades/membranes jonctionnelles, reliant la signalisation kinase à l’assemblage des sarcomères et aux processus de gestion du calcium dans les cardiomyocytes et les fibres musculaires squelettiques. La perturbation des voies dépendantes de Speg a été associée à des défauts du développement musculaire et de la fonction contractile, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des mécanismes à l’origine de phénotypes de cardiomyopathie et de myopathie dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO APEG1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Speg dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Speg, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Speg à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine APEG1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Speg pour l'étude de la signalisation de APEG1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Speg essentiels à la fonction de APEG1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Speg pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le APEG1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le APEG1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Speg. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le APEG1 plasmide HDR (m) et le APEG1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Speg pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Speg définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.