Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide Double Nickase (h) ANP32B: sc-417840-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ANP32B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ANP32B Double Nickase (h) et le plasmide ANP32B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANP32B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ANP32B | sc-417840-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANP32B (membre B de la famille des phosphoprotéines nucléaires acides riches en leucine 32) est une phosphoprotéine nucléaire conservée, impliquée dans des processus associés à la chromatine, la régulation transcriptionnelle et le contrôle du cycle cellulaire. En tant que membre de la famille ANP32, ANP32B contribue à la modulation des phosphatases protéiques, à la signalisation liée à l’apoptose et à des fonctions nucléaires associées à l’ARN qui influencent les réponses cellulaires au stress. Une perturbation de l’activité d’ANP32B a été associée à une capacité proliférative modifiée et à des programmes d’expression génique dérégulés observés dans de multiples contextes liés au cancer. Ces caractéristiques font d’ANP32B une cible utile pour l’étude des réseaux de signalisation nucléaire, de la dynamique de la chromatine et des déterminants des décisions de destinée cellulaire dans des modèles de cellules humaines.
ANP32B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANP32B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANP32B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANP32B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANP32B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.