Plasmide Double Nickase (h) Annexin IV: sc-402134-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Annexin IV correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Annexin IV Double Nickase (h) et le plasmide Annexin IV Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANXA4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Annexin IV Antibody (D-2): sc-46693
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Annexin IV | sc-402134-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Annexin IV | sc-402134-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA4 code l’annexine IV, une protéine de liaison aux phospholipides dépendante du Ca²⁺, qui s’associe au feuillet interne de la membrane plasmique et des endomembranes afin de réguler l’organisation et la courbure membranaires ainsi que le trafic vésiculaire. L’annexine IV participe à la signalisation sensible au Ca²⁺ et à la dynamique du cytosquelette, influençant des processus tels que l’exocytose, l’endocytose et le transport ionique épithélial, et elle a été associée à la modulation de la réparation membranaire et des réponses au stress cellulaire. Une expression altérée d’ANXA4 a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux et affections inflammatoires, où la protéine est étudiée pour ses rôles dans la survie cellulaire, la migration et les phénotypes de réponse aux médicaments. Ces caractéristiques font d’ANXA4 une cible utile pour disséquer des voies associées aux membranes, pertinentes pour la biologie épithéliale et le comportement des cellules cancéreuses.
Annexin IV Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANXA4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANXA4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANXA4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANXA4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.