Plasmide Double Nickase (h) ANKRD13D: sc-415493-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ANKRD13D correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ANKRD13D Double Nickase (h) et le plasmide ANKRD13D Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANKRD13D. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ANKRD13D | sc-415493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ANKRD13D | sc-415493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANKRD13D code une protéine contenant des domaines à répétitions ankyrine, impliquée dans des interactions protéine–protéine qui coordonnent le trafic endocytique et le contrôle qualité associé aux membranes. Les membres de la famille ANKRD13 ont été reliés à des événements de tri dépendants de l’ubiquitine et à la régulation du renouvellement des récepteurs, ce qui suggère un rôle dans le couplage des signaux d’ubiquitination aux voies de transport vésiculaire. Par ces processus, ANKRD13D est pertinente pour l’étude de la protéostase, de la dynamique des endosomes et de l’atténuation de la signalisation à la membrane plasmique. La dérégulation du trafic et du tri médié par l’ubiquitine est fréquemment associée à une altération de la signalisation des facteurs de croissance et des réponses cellulaires au stress, faisant d’ANKRD13D une cible utile pour des investigations mécanistiques dans des modèles pertinents pour les maladies.
ANKRD13D Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANKRD13D dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANKRD13D. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANKRD13D. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANKRD13D.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.