Plasmide CRISPR/Cas9 KO Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m): sc-419041

Présentation

L’angiopoïétine 1 (ANGPT1 ; Ang-1) est un facteur de croissance vasculaire sécrété qui se lie au récepteur tyrosine kinase endothélial TIE2/TEK afin de favoriser la maturation des vaisseaux, la survie des cellules endothéliales et la stabilisation de la barrière vasculaire. Dans les tissus murins, la signalisation d’ANGPT1 coordonne le recrutement des péricytes, le remodelage de la matrice extracellulaire et les réponses anti‑perméabilité, contrebalançant les signaux déstabilisateurs lors du bourgeonnement angiogénique. Cette voie contribue à la régulation de la quiescence vasculaire et du trafic des cellules inflammatoires en modulant l’intégrité des jonctions et les programmes d’activation endothéliale. La dérégulation de la signalisation ANGPT1–TIE2 a été impliquée dans l’angiogenèse pathologique et les phénotypes de fuite vasculaire, pertinents pour le remodelage du microenvironnement tumoral, les modèles de lésion ischémique et la recherche sur les maladies vasculaires inflammatoires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Angpt1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Angpt1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Angpt1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Angpt1 pour l'étude de la signalisation de Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Angpt1 essentiels à la fonction de Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Angpt1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Angpt1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 plasmide HDR (m) et le Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Angpt1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Angpt1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.