Plasmide Double Nickase (h) ANG I: sc-401766-NIC

Le gène humain **ANG** code l'angiogénine (ANG I), une protéine sécrétée de la superfamille **RNase A** qui régule la migration et la prolifération des cellules endothéliales, ainsi que les réponses néovasculaires. Au-delà de ses rôles de signalisation extracellulaire, l'angiogénine peut être internalisée et influencer la transcription de l'ARNr et des programmes d'adaptation au stress via le clivage des ARNt et la génération de **tiARN**, établissant un lien avec le contrôle de la traduction. Les voies dépendantes d'ANG s'entrecroisent avec les réponses à l'hypoxie, le remodelage de la matrice extracellulaire et la signalisation inflammatoire qui façonnent la vascularisation des tissus. Une expression ou une activité d'ANG dérégulée a été associée à une altération de l'équilibre angiogénique dans des contextes de biologie du cancer et de recherche sur la neurodégénérescence, notamment dans des études portant sur la vulnérabilité des motoneurones.

ANG I Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANG.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.