Plásmido Doble Nickase (h) alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2: sc-401939-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 (h) y el plásmido de doble nickasa alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATP1A2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 | sc-401939-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 | sc-401939-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP1A2 codifica la subunidad catalítica alfa-2 de la Na⁺/K⁺-ATPasa, una ATPasa de tipo P de la membrana plasmática que mantiene los gradientes de Na⁺ y K⁺ mediante la hidrólisis de ATP. Al sostener el potencial de membrana en reposo y la homeostasis iónica, ATP1A2 influye en la excitabilidad neuronal y glial, el transporte activo secundario y el equilibrio osmótico, con efectos posteriores sobre el manejo de Ca²⁺ a través del intercambio Na⁺/Ca²⁺. La proteína contribuye a procesos como la recuperación del potencial de acción, la depuración de neurotransmisores en astrocitos y la regulación del volumen celular. Las alteraciones genéticas y funcionales de ATP1A2 se han vinculado a fenotipos neurológicos como la migraña hemipléjica familiar y la susceptibilidad a convulsiones, lo que la convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos de la excitabilidad y la desregulación del transporte iónico.
alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATP1A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATP1A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATP1A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATP1A2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.