AK1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419062

개요

Ak1는 아데닐레이트 키나아제 1(AK1)을 암호화하며, AK1은 세포질에 존재하는 인산기 전달효소로서 ATP + AMP ⇌ 2 ADP의 가역 반응을 촉매합니다. 이를 통해 아데닌 뉴클레오타이드 항상성을 유지하고 세포 에너지 충전(energy charge)을 완충하는 데 기여합니다. AK1은 ATP/ADP/AMP 상호전환을 해당과정 및 산화적 인산화의 수요와 연동함으로써, 근수축, 신경활동, 스트레스 반응처럼 에너지 소모가 큰 상황에서의 에너지 플럭스에 영향을 미칩니다. 아데닐레이트 키나아제 활성의 변화는 AMPK 및 퓨린 대사와 연결되는 경로를 포함해 AMP 의존적 신호전달을 조절할 수 있으며, 그 결과 Ak1는 대사 적응과 산화환원(레독스) 균형과도 연관됩니다. 마우스 시스템에서 Ak1를 교란하는 접근은 임상적 결과를 의미하지 않으면서도 에너지 대사, 미토콘드리아 기능, 그리고 심대사 및 신경근 기능장애와 관련된 표현형을 연구하는 데 도움을 줍니다.

AK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ak1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ak1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ak1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 AK1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 AK1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ak1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• AK1 기능에 중요한 Ak1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ak1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• AK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 AK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ak1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  AK1 HDR 플라스미드 (m) 및 AK1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ak1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ak1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.