Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO AIP2 (h): sc-417914
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AIP2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AIP2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AIP2 Antibody (A-3): sc-398090
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AIP2 (h) | sc-417914 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
WWP2 code pour la ligase E3 ubiquitine-protéine AIP2, une ligase ubiquitine de type HECT qui catalyse le transfert d’ubiquitine afin de réguler la stabilité des protéines et l’intensité des signaux de signalisation. AIP2 participe au contrôle, dépendant de l’ubiquitine, de processus cellulaires clés, notamment la protéostasie, le renouvellement des récepteurs et des facteurs de transcription, ainsi que l’ajustement fin des voies de signalisation dans des contextes tels que la voie TGF-β/SMAD et des réseaux régulateurs apparentés. Par ces fonctions, WWP2 contribue à la modulation des programmes de croissance cellulaire, de différenciation et de transition épithélio-mésenchymateuse. Une ubiquitination dérégulée impliquant WWP2 a été associée à des états de signalisation altérés observés dans plusieurs modèles pertinents pour la maladie, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique dans l’étude des déséquilibres de voies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AIP2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène WWP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du WWP2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert WWP2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AIP2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en WWP2 pour l'étude de la signalisation de AIP2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de WWP2 essentiels à la fonction de AIP2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de WWP2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AIP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le AIP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus WWP2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AIP2 plasmide HDR (h) et le AIP2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie WWP2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles WWP2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.