Plasmide Double Nickase (h) ADM: sc-402779-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ADM correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ADM Double Nickase (h) et le plasmide ADM Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADM. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ADM Antibody (HTA171/E8): sc-53153
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ADM | sc-402779-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ADM | sc-402779-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’adrénomédulline (ADM) est une hormone peptidique sécrétée, issue de la maturation d’une préproprotéine de plus grande taille, et largement exprimée dans les tissus vasculaires et endocriniens. En signalant via le récepteur de type calcitonine (CALCRL) en complexe avec RAMP2 ou RAMP3, l’ADM active la voie AMPc/PKA ainsi que des voies en aval liées aux MAPK et à la PI3K, qui régulent la vasodilatation, la fonction de barrière endothéliale, les réponses angiogéniques et l’adaptation cellulaire au stress. L’ADM est induite par l’hypoxie et des signaux inflammatoires, et contribue au remodelage vasculaire, à l’homéostasie hydrique et à la communication entre cellules immunitaires et stroma. Une dérégulation de la signalisation de l’ADM a été associée à des dysfonctionnements cardiométaboliques, à des états inflammatoires et à l’angiogenèse associée aux tumeurs, ce qui soutient son intérêt en tant que nœud mécanistique pour la recherche sur le microenvironnement et la biologie vasculaire.
ADM Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADM dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADM. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADM. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADM.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.