ADM Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419009
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ADM El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ADM, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ADM Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419009 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La adrenomedulina (ADM) es un péptido vasoactivo secretado, codificado por el gen Adm del ratón, que señaliza principalmente a través del complejo del receptor similar al receptor de calcitonina junto con RAMP2 o RAMP3, activando respuestas dependientes de cAMP/PKA. Contribuye a la regulación del tono vascular, la función de barrera endotelial, la angiogénesis y la homeostasis hidroelectrolítica, y puede modular la señalización inflamatoria en células endoteliales e inmunitarias. La actividad de ADM se entrecruza con programas sensibles a la hipoxia y con vías adaptativas al estrés que influyen en la perfusión y la remodelación tisular. La expresión o señalización desregulada de ADM se ha asociado con la biología de enfermedades cardiometabólicas e inflamatorias, incluida la disfunción vascular relacionada con la hipertensión y respuestas microvasculares alteradas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADM (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adm en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adm junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adm tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADM.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adm para la investigación de la señalización de ADM, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Adm críticos para la función de ADM
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adm para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ADM CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADM CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adm. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADM (m) y el plásmido HDR ADM (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adm para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adm definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.