Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6: sc-401251-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Double Nickase (h) et le plasmide Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADCY6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 | sc-401251-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 | sc-401251-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **ADCY6** code l’adénylate cyclase 6 (AC6), une enzyme associée à la membrane qui convertit l’ATP en AMPc en aval des récepteurs couplés aux protéines G, en intégrant des signaux issus des voies couplées à **Gαs** et à **Gαi**. L’AMPc produit par AC6 régule les voies **PKA** et **EPAC**, façonnant des réseaux de phosphorylation qui influencent le transport ionique, la contractilité, le contrôle métabolique et des programmes transcriptionnels dépendants des stimuli tels que **CREB**. En tant qu’effecteur clé de la production de seconds messagers induite par les récepteurs, **ADCY6** est fréquemment étudié dans des contextes de dérégulation de la signalisation GPCR et d’altération de l’homéostasie de l’AMPc, notamment en biologie cardiovasculaire et des voies aériennes, ainsi que dans des phénotypes endocriniens et métaboliques. Son activité compartimentée à la membrane plasmique en fait un outil utile pour étudier les microdomaines de signalisation et les interactions croisées avec les voies du calcium et des phosphodiestérases.
Adenylate cyclase 6/AC6/ADCY6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADCY6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADCY6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADCY6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADCY6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.