Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2: sc-402994-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 (h) y el plásmido de doble nickasa Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADCY2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 Anticuerpo (F-7): sc-514938
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 | sc-402994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 | sc-402994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **ADCY2** codifica la adenilato ciclasa 2 (AC2), una enzima asociada a la membrana que convierte ATP en AMP cíclico (cAMP) aguas abajo de receptores acoplados a proteínas G activados. Al modular la dinámica del cAMP, AC2 regula la señalización de la proteína quinasa A (PKA) y de EPAC, influyendo en la actividad de canales iónicos, la liberación de neurotransmisores y la transcripción génica dependiente de estímulos a través de CREB. La actividad de ADCY2 se integra con las vías GPCR–Gαs/Gαi y contribuye a decisiones celulares relacionadas con la excitabilidad, el metabolismo y la adaptación de la señal. Alteraciones genéticas y de señalización que afectan la homeostasis del cAMP se han asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y cardiometabólicos, lo que convierte a ADCY2 en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de redes de señalización impulsadas por GPCR.
Adenylate cyclase 2/AC2/ADCY2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADCY2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADCY2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADCY2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADCY2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.