Plasmide Double Nickase (m) Adenosine A2B-R: sc-419015-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Adenosine A2B-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Adenosine A2B-R Double Nickase (m) et le plasmide Adenosine A2B-R Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Adora2b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Adenosine A2B-R | sc-419015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Adenosine A2B-R | sc-419015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adora2b code le récepteur murin de l’adénosine A2B (Adenosine A2B-R), un récepteur couplé aux protéines G qui détecte l’adénosine extracellulaire produite lors du stress métabolique et de l’inflammation. A2B-R se couple principalement aux voies de signalisation Gs et Gq pour réguler les voies cAMP/PKA et PLC–Ca²⁺, modulant ainsi des cascades de kinases en aval et des programmes transcriptionnels qui influencent la fonction de barrière, la production de cytokines et le tonus vasculaire. Dans les compartiments immunitaires et stromaux, la signalisation A2B-R module le trafic des leucocytes, l’activation myéloïde et les réponses des fibroblastes, intégrant les signaux purinergiques aux réseaux associés à l’hypoxie et à l’inflammation. Une activité dérégulée d’ADORA2B a été impliquée dans des processus inflammatoires et fibrotiques, le remodelage tissulaire associé à l’ischémie et la signalisation du microenvironnement tumoral, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la régulation purinergique dans des modèles de maladie.
Adenosine A2B-R Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Adora2b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Adora2b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Adora2b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Adora2b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.