Partículas Lentivirales de Activación (h) Adenosine A2A-R: sc-400807-LAC

ADORA2A codifica el receptor humano de adenosina A2A (A2A-R), un receptor acoplado a proteína G que señaliza principalmente a través de Gs para elevar el cAMP y activar programas transcripcionales dependientes de PKA y CREB. El A2A-R integra señales extracelulares de adenosina con circuitos neuromoduladores e inmunorreguladores, modelando procesos como la liberación de neurotransmisores, la plasticidad sináptica y la producción de mediadores inflamatorios. La actividad del receptor se cruza con la señalización MAPK/ERK, la homeostasis del calcio y la regulación de redes de citocinas, vinculando la expresión de ADORA2A con respuestas al estrés y cambios en el microambiente tisular. La señalización desregulada de ADORA2A se ha estudiado en contextos que incluyen la neuroinflamación, la neurodegeneración y la inmunosupresión asociada a tumores, lo que la hace relevante para el mapeo de vías y la validación mecanística de dianas en modelos celulares humanos.

Las partículas de activación lentiviral Adenosine A2A-R (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ADORA2A en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Adenosine A2A-R (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ADORA2A, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Adenosine A2A-R. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ADORA2A y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.