Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ADAM9 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-418994
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ADAM9 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ADAM9, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ADAM9 Antibody (G-1): sc-377233
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ADAM9 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-418994 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Adam9 codifica ADAM9, una metalloproteasi-disintegrina ancorata alla membrana che media lo “shedding” dell’ectodominio delle proteine di superficie cellulare e contribuisce al rimodellamento della matrice extracellulare. Attraverso l’elaborazione proteolitica di recettori, molecole di adesione e precursori di fattori di crescita, ADAM9 modula reti di segnalazione quali le vie correlate a EGFR/ErbB, l’adesione integrina-dipendente e le risposte migratorie. Nei sistemi murini, ADAM9 è stata collegata alla regolazione dell’infiammazione, alle risposte al danno tissutale e a processi del microambiente associati ai tumori, risultando rilevante per studi su fibrosi, neuroinfiammazione e biologia del cancro. La sua attività influenza la comunicazione cellula–cellula e le cascate proteasiche che modellano le interazioni epitelio–stroma e il traffico delle cellule immunitarie.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM9 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Adam9 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Adam9 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Adam9 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ADAM9.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Adam9 per lo studio della segnalazione di ADAM9, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Adam9 critici per la funzione di ADAM9
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Adam9 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ADAM9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ADAM9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Adam9. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ADAM9 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ADAM9 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Adam9 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Adam9 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.