ADAM19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418986

Descripción general

ADAM19 (desintegrina y metaloproteinasa 19) es una metaloproteasa anclada a la membrana que regula el desprendimiento (shedding) del ectodominio de proteínas de la superficie celular, lo que influye en la señalización de factores de crecimiento y citocinas, así como en las interacciones célula–célula y célula–matriz. En tejidos de ratón, ADAM19 contribuye a programas del desarrollo, incluida la morfogénesis cardiovascular y craneofacial, y modula respuestas inflamatorias y de remodelación. Al controlar el procesamiento de sustratos en la membrana plasmática, se integra con vías que gobiernan la proliferación, la migración y la diferenciación, con efectos posteriores sobre MAPK/ERK y otras cascadas de transducción de señales. Las alteraciones en la actividad o la expresión de ADAM19 se han asociado con la remodelación patológica de tejidos y fenotipos relacionados con la fibrosis, lo que la convierte en una diana útil para estudios mecanísticos en modelos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAM19 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adam19 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adam19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adam19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAM19.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adam19 para la investigación de la señalización de ADAM19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adam19 críticos para la función de ADAM19
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adam19 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAM19 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADAM19 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adam19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAM19 (m) y el plásmido HDR ADAM19 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adam19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adam19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.