ADAM15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405627

Übersicht

ADAM15 kodiert eine transmembrane Metalloprotease-Disintegrin, die über ihre Protease-, Disintegrin- und zytoplasmatischen Domänen am Ectodomain-Shedding sowie an Zell-Zell- und Zell-Matrix-Interaktionen beteiligt ist. Sie moduliert Signalnetzwerke, die mit Adhäsion und Motilität verknüpft sind, einschließlich integrinassoziierter Signalwege, und kann über regulierte Proteolyse die Verfügbarkeit membrangebundener Liganden und Rezeptoren beeinflussen. Die Aktivität von ADAM15 wird mit Prozessen wie Migration, Invasion und inflammatorischer Signalübertragung in Verbindung gebracht, und eine veränderte Expression wurde in verschiedenen Krankheitskontexten beschrieben, darunter Krebsprogression und vaskuläre Pathologien. Als oberflächenassoziierte Protease wird ADAM15 häufig im Hinblick auf ihren Beitrag zum extrazellulären Remodeling und zum Crosstalk der Signaltransduktion an der Plasmamembran untersucht.

Das ADAM15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADAM15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADAM15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADAM15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADAM15-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADAM15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADAM15-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADAM15-Exone abzielen, die für die ADAM15-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADAM15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADAM15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ADAM15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADAM15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADAM15 HDR-Plasmid (h) und ADAM15 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADAM15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADAM15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.