Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ACSVL6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405327
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ACSVL6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ACSVL6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACSVL6 Anticuerpo (C-8): sc-377374
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ACSVL6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405327 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC27A5 codifica la acil‑CoA sintetasa humana de la familia de cadenas muy largas, miembro 6 (ACSVL6), una enzima que activa los ácidos grasos de cadena larga al convertirlos en tioésteres acil‑CoA. Esta reacción favorece la captación de lípidos y su tráfico intracelular hacia la β‑oxidación mitocondrial y peroxisomal, y además aporta sustratos acil‑CoA para el remodelado lipídico relacionado con triglicéridos, fosfolípidos y ácidos biliares. A través de estas funciones, ACSVL6 contribuye a la homeostasis metabólica e interactúa con vías que controlan el balance energético, la composición de membranas y la señalización lipídica. Las alteraciones en la activación de ácidos grasos y en el flujo lipídico aguas abajo suelen estar implicadas en disfunción metabólica y fenotipos asociados al hígado, por lo que SLC27A5 es un objetivo útil para estudios mecanísticos del metabolismo lipídico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACSVL6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC27A5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC27A5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC27A5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACSVL6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC27A5 para la investigación de la señalización de ACSVL6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC27A5 críticos para la función de ACSVL6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC27A5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ACSVL6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ACSVL6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC27A5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACSVL6 (h) y el plásmido HDR ACSVL6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC27A5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC27A5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.