Plasmide Double Nickase (h) ACSVL1: sc-405122-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACSVL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACSVL1 Double Nickase (h) et le plasmide ACSVL1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC27A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACSVL1 Antibody (D-7): sc-393906
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACSVL1 | sc-405122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACSVL1 | sc-405122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC27A2 code l’acyl‑CoA synthétase des acides gras à très longue chaîne 1 (ACSVL1/FATP2), une enzyme associée aux membranes qui active les acides gras à longue et très longue chaîne en thioesters d’acyl‑CoA, permettant leur orientation vers la β‑oxydation, la synthèse de lipides complexes et le remodelage lipidique. En contrôlant l’absorption des acides gras et leur activation intracellulaire, ACSVL1 influence le métabolisme lipidique mitochondrial et peroxysomal, l’homéostasie énergétique et les réponses cellulaires à la disponibilité des nutriments. Une prise en charge dérégulée des acides gras impliquant SLC27A2 a été étudiée dans des phénotypes métaboliques tels que la stéatose hépatique et l’insulinorésistance, ainsi que dans des programmes métaboliques lipidiques altérés pertinents pour l’inflammation et la bioénergétique des cellules tumorales. Ces propriétés font d’ACSVL1 un nœud utile pour disséquer la signalisation induite par les lipides et la reprogrammation métabolique dans des modèles cellulaires humains.
ACSVL1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC27A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC27A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC27A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC27A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.