Plasmide Double Nickase (h) ACSS2: sc-402873-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACSS2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACSS2 Double Nickase (h) et le plasmide ACSS2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACSS2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACSS2 Antibody (A-9): sc-398559
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACSS2 | sc-402873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACSS2 | sc-402873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSS2 (acétyl‑CoA synthétase, membre 2 de la famille à chaîne courte) catalyse la conversion de l’acétate en acétyl‑CoA, reliant l’utilisation de l’acétate au métabolisme central du carbone et à la biosynthèse des lipides. En fournissant de l’acétyl‑CoA nucléocytosolique, ACSS2 soutient l’acétylation des protéines et la régulation de la chromatine, intégrant la disponibilité en nutriments au contrôle transcriptionnel en situation de stress métabolique. L’activité d’ACSS2 s’articule avec des voies qui gouvernent le métabolisme des acides gras, l’autophagie et les réponses adaptatives à l’hypoxie, et sa dérégulation a été étudiée dans des contextes de reprogrammation métabolique. Des altérations du flux d’acétate et de l’homéostasie de l’acétyl‑CoA impliquant ACSS2 sont associées à des modifications de l’état épigénétique et à des transitions d’état cellulaire pertinentes pour la biologie des maladies prolifératives et inflammatoires.
ACSS2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACSS2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACSS2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACSS2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACSS2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.