ACSS2 Plasmide Double Nickase (h): sc-402873-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ACSS2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ACSS2 Double Nickase Plasmid (h) e il ACSS2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ACSS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ACSS2 Antibody (A-9): sc-398559
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ACSS2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACSS2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSS2 (acil-CoA sintetasi, membro 2 della famiglia a catena corta) catalizza la conversione dell’acetato in acetil-CoA, collegando l’utilizzo dell’acetato al metabolismo centrale del carbonio e alla biosintesi dei lipidi. Fornendo acetil-CoA nucleo-citosolico, ACSS2 sostiene l’acetilazione delle proteine e la regolazione della cromatina, integrando la disponibilità di nutrienti con il controllo trascrizionale in condizioni di stress metabolico. L’attività di ACSS2 interseca vie che governano il metabolismo degli acidi grassi, l’autofagia e le risposte adattative all’ipossia, e la sua disregolazione è stata studiata in contesti di riprogrammazione metabolica. Alterazioni del flusso di acetato e dell’omeostasi dell’acetil-CoA che coinvolgono ACSS2 sono associate a cambiamenti dello stato epigenetico e a transizioni dello stato cellulare rilevanti per la biologia delle malattie proliferative e infiammatorie.
ACSS2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ACSS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ACSS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ACSS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ACSS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.