Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACSL5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436628
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ACSL5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ACSL5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ACSL5 Anticuerpo (A-2): sc-365478
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ACSL5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436628 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Acsl5 codifica la acil‑CoA sintetasa de cadena larga miembro 5 (ACSL5), una enzima asociada a mitocondrias y retículo endoplásmico que activa ácidos grasos de cadena larga a tioésteres de acil‑CoA, comprometiéndolos con la β‑oxidación, la síntesis de triglicéridos y la remodelación de fosfolípidos. Al moldear la composición del pool de acil‑CoA, ACSL5 influye en la homeostasis energética, la composición lipídica de membrana y las vías de señalización derivadas de lípidos vinculadas al metabolismo mitocondrial y al estrés oxidativo. En tejidos de ratón con alta demanda metabólica, la actividad alterada de ACSL5 se ha asociado con perturbaciones en la utilización de ácidos grasos y en vías sensibles a la insulina, lo que respalda su relevancia para estudios de desregulación metabólica y fenotipos inflamatorios asociados a lípidos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ACSL5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Acsl5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Acsl5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Acsl5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ACSL5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Acsl5 para la investigación de la señalización de ACSL5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Acsl5 críticos para la función de ACSL5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Acsl5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ACSL5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ACSL5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Acsl5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ACSL5 (m) y el plásmido HDR ACSL5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Acsl5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Acsl5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.