Plasmide Double Nickase (h) ACSL3: sc-403546-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACSL3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACSL3 Double Nickase (h) et le plasmide ACSL3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACSL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACSL3 Antibody (H-9): sc-166374
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACSL3 | sc-403546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACSL3 | sc-403546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSL3 (acyl-CoA synthétase, membre 3 de la famille des enzymes à chaîne longue) est une enzyme associée au réticulum endoplasmique qui active les acides gras à longue chaîne en thioesters d’acyl-CoA, une étape indispensable à la biosynthèse des lipides et à l’utilisation des acides gras. En orientant les acides gras vers la production de phospholipides et de lipides neutres, ACSL3 influence le remodelage des membranes, la biogenèse des gouttelettes lipidiques et des programmes métaboliques plus larges liés à la croissance cellulaire et à l’adaptation au stress. Son activité s’articule avec des voies contrôlant l’absorption des acides gras, l’homéostasie lipidique du RE et l’approvisionnement mitochondrial en lipides, façonnant la bioénergétique et la disponibilité des lipides de signalisation. Des altérations de la régulation d’ACSL3 ont été étudiées dans des contextes de reprogrammation métabolique, d’inflammation associée aux lipides et de transformation oncogénique, où l’activation des acides gras peut contribuer à des profils lipidiques déterminants pour le phénotype.
ACSL3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACSL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACSL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACSL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACSL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.