Plásmido Doble Nickase (m) ACAD-9: sc-432841-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ACAD-9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ACAD-9 (m) y el plásmido de doble nickasa ACAD-9 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Acad9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ACAD-9 | sc-432841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) ACAD-9 | sc-432841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Acad9 codifica ACAD-9, una flavoproteína mitocondrial que actúa como una acil-CoA deshidrogenasa en la β‑oxidación de ácidos grasos y que también respalda la fosforilación oxidativa mediante funciones vinculadas al ensamblaje y la estabilidad del complejo I (NADH:ubiquinona oxidorreductasa). Al acoplar el flujo de electrones derivado de los lípidos con la función de la cadena respiratoria, ACAD-9 contribuye al equilibrio redox mitocondrial, la producción de ATP y la adaptación metabólica en tejidos con alta demanda energética. La alteración de la actividad de ACAD-9 se asocia con una respiración mitocondrial deficiente, perfiles de acilcarnitinas modificados y estrés bioenergético celular, lo que convierte a Acad9 en un objetivo relevante para estudios sobre mecanismos de enfermedad mitocondrial. En modelos murinos y sistemas celulares, la perturbación de Acad9 permite investigar la remodelación metabólica, el manejo de ROS y las vías de señalización mito‑nucleares en condiciones de utilización de ácidos grasos y restricción de la cadena respiratoria.
ACAD-9 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Acad9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Acad9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Acad9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Acad9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.