Plasmide Double Nickase (h) ABHD5: sc-402273-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABHD5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABHD5 Double Nickase (h) et le plasmide ABHD5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABHD5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ABHD5 Antibody (E-1): sc-376931
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABHD5 | sc-402273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABHD5 | sc-402273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD5 (également connu sous le nom de CGI-58) code un coactivateur associé aux gouttelettes lipidiques qui stimule la lipase des triglycérides du tissu adipeux (PNPLA2/ATGL) et favorise l’hydrolyse intracellulaire des triglycérides. En régulant la lipolyse, la mobilisation des acides gras et la dynamique des gouttelettes lipidiques, ABHD5 influence l’homéostasie énergétique et les voies de signalisation en aval liées à la β‑oxydation mitochondriale et aux réponses cellulaires au stress. La perturbation du catabolisme lipidique dépendant d’ABHD5 est associée à des phénotypes de stockage de lipides neutres et a été impliquée dans une dérégulation métabolique touchant les tissus hépatiques, cutanés et musculaires. En tant que nœud central du métabolisme lipidique, ABHD5 est fréquemment étudié dans le contexte des maladies de stockage lipidique, des voies métaboliques liées à l’inflammation et du remodelage des gouttelettes lipidiques spécifique aux types cellulaires.
ABHD5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABHD5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABHD5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABHD5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABHD5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.