Plásmido Doble Nickase (h) ABHD3: sc-414947-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ABHD3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ABHD3 (h) y el plásmido de doble nickasa ABHD3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ABHD3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ABHD3 | sc-414947-NIC | 20 µg | $410.00 |
La ABHD3 humana (abhydrolase domain containing 3) es una hidrolasa de serina que contribuye al catabolismo lipídico al hidrolizar fosfolípidos oxidados y de cadena media, incluidos sustratos lisofosfolipídicos, influyendo así en la remodelación de los lípidos de membrana y en la señalización derivada de lípidos. Mediante la regulación de la homeostasis de los fosfolípidos, ABHD3 se vincula con vías que gobiernan las respuestas al estrés oxidativo, la señalización inflamatoria y la dinámica de las membranas de orgánulos. Se han descrito alteraciones en la expresión o la actividad de ABHD3 en contextos de desregulación metabólica y biología tumoral, donde los cambios en la composición de fosfolípidos pueden afectar la proliferación, la migración y la tolerancia al estrés celular. Como resultado, ABHD3 se estudia con frecuencia en análisis a nivel de sistemas del metabolismo de lípidos, la biología redox y las redes de señalización asociadas a membranas.
ABHD3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABHD3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABHD3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABHD3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABHD3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.